液相色譜儀是目前應(yīng)用zui多的色譜分析方法，液相色譜系統(tǒng)由流動相儲液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成，其整體組成類似于氣相色譜，液相色譜儀但是針對其流動相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn)；進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密；由于液體流動相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體，液相色譜儀為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗，長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。HPLC應(yīng)用非常廣泛，液相色譜儀幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域。

 

　　使用液相色譜儀時(shí)，液體待檢測物被注入色譜柱，通過壓力在固定相中移動，由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱，液相色譜儀通過檢測器得到不同的峰信號，zui后通過分析比對這些信號來判斷待側(cè)物所含有的物質(zhì)。液相色譜作為一種重要的分析方法，廣泛的應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。液相色譜儀從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別，它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和微粒固定相，液相色譜儀適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。

 

　　一、液相色譜儀主要特點(diǎn)

 

　　高壓——壓力可達(dá)150～300 kg/cm2。色譜柱每米降壓為75 kg/cm2以上。

 

　　高速——流速為0.1～10.0 mL/min。

 

　　——塔板數(shù)可達(dá)5000/米。液相色譜儀在一根柱中同時(shí)分離成份可達(dá)100種。

 

　　高靈敏度——紫外檢測器靈敏度可達(dá)0.01ng。同時(shí)消耗樣品少。

 

　　二、液相色譜儀相比有以下優(yōu)點(diǎn)：

 

　　速度快——通常分析一個(gè)樣品在15～30 min，有些樣品甚至在5 min內(nèi)即可完成。

 

　　分辨率高——液相色譜儀可選擇固定相和流動相以達(dá)到*分離效果。

 

　　靈敏度高——紫外檢測器可達(dá)0.01ng，熒光和電化學(xué)檢測器可達(dá)0.1pg。

 

　　色譜柱可反復(fù)使用——用一根色譜柱可分離不同的化合物。

 

　　樣品量少，液相色譜儀容易回收——樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。